丙型肝炎的實驗室診斷

央視國際 2004年08月31日 16:19

　　(一)血清生化學檢測

　　ALT、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)水平變化可反映肝細胞損害程度，但ALT、AST水平與HCV感染引起的肝組織炎症分度和病情的嚴重程度不一定平行；急性丙型肝炎患者的ALT和AST水平一般較低，但也有較高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝血酶原活動度和膽鹼酯酶活性降低較少，但在病程較長的慢性肝炎、肝硬化或重型肝炎時可明顯降低，其降低程度與疾病的嚴重程度成正比。

　　慢性丙型肝炎患者中，約30％ALT水平正常，約40％ALT水平低於2倍正常值上限。雖然大多數此類患者只有輕度肝損傷，但有部分患者可發展為肝硬化。ALT水平下降是抗病毒治療中出現應答的重要指標之一。凝血酶原時間可作為慢性丙型肝炎患者病情進展的監測指標，但迄今尚無一個或一組血清學標誌可對肝纖維化進行準確分期。

　　(二)抗-HCV檢測

　　抗-HCV酶免疫法(EIA)適用於高危人群篩查，也可用於HCV感染者的初篩。但抗-HCV陰轉與否不能作為抗病毒療效的指標。用第三代EIA法檢測丙型肝炎患者，其敏感度和特異度可達99％，因此，不需要用重組免疫印跡法(RIBA)驗證。但一些透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出現抗-HCV假陽性，因此，HCV RNA檢測有助於確診這些患者是否合併感染HCV。

　　(三)HCV RNA檢測

　　在HCV急性感染期，在血漿或血清中的病毒基因組水平可達到105～107拷貝/ml。在HCV慢性感染者中，HCV RNA水平在不同個體之間存在很大差異，變化範圍在5104～5106拷貝/ml之間，但同一名患者的血液中HCVRNA水平相對穩定。

　　1．HCV RNA定性檢測：對抗-HCV陽性的HCV持續感染者，需要通過HCV RNA定性試驗確證。HCV RNA定性檢測的特異度在98％以上，只要一次病毒定性檢測為陽性，即可確證HCV感染，但一次檢測陰性並不能完全排除HCV感染，應重復檢查。

　　2．HCV RNA定量檢測：定量聚合酶鏈反應(qPCR)、分枝DNA(bDNA)、實時熒光定量PCR法均可檢測HCV RNA病毒載量。國外HCV RNA定量檢測試劑盒有PCR擴增的Cobas V2.0、SuperQuant、LCx HCV RNA定量分析法等，但bDNA的Versant HCVRNA 2.0和3.0定量分析法應用較為廣泛。國內的實時熒光定量PCR法已獲得國家食品藥品監督管理局(SFDA)的正式批准。不同HCV RNA定量檢測法可用拷貝/ml和IU/ml兩種表示方法，兩者之間進行換算時，應採用不同檢測方法的換算公式，如羅氏公司Cobas V2.0的IU/ml與美國國立遺傳學研究所的SuperQuant的拷貝數/ml換算公式是：IU/ml=0.854拷貝數/ml+0.538。

　　HCV病毒載量的高低與疾病的嚴重程度和疾病的進展並無絕對相關性，但可作為抗病毒療效評估的觀察指標。在HCV RNA檢測中，應注意可能存在假陽性和假陰性結果。

　　(四)HCV基因分型

　　HCV RNA基因分型方法較多，國內外在抗病毒療效考核研究中，應用Simmonds等1～6型分型法最為廣泛。HCV RNA基因分型結果有助於判定治療的難易程度及制定抗病毒治療的個體化方案。